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        液氮罐中液氮研磨如何操作

        時間:2020-06-10 10:29來源:未知 作者:班德液氮罐 點擊:
        液氮研磨如何操作?先了解一下液氮研磨原理吧!

        液氮容器的準備

        液氮一般保存于液氮罐中。實驗前先準備一個保溫桶,將適量液氮轉移至保溫桶中,同時還要準備一個不銹鋼或塑料湯勺,湯勺的柄不夠長時要想辦法加長,以免凍傷手。

        組織的處理及用量

        任何組織在獲得后如不立即使用,要盡快保存在低溫環境中(一196℃液氮中速凍,一70℃保存)。使用時,植物組織應當先用自來水清洗外表的泥沙,用單蒸水沖洗兩遍,用75%乙醇浸洗約30秒,再用滅菌雙蒸水沖洗兩遍,用無菌濾紙吸干,然后根據需要取適當部位的組織。動物組織不必清洗,但要盡量剔除周邊的組織及血塊。組織的取量要比實際需要量大1一2倍,因為研磨時部分組織會粘在研缽和研棒上,會致部分組織樣本丟失。

        研缽的固定

        我們在實驗時發現,研缽在加液氮后溫度很低,外表會形成許多冰晶,用力研磨組織時易打滑,研缽內的組織液氮混合物很容易濺出,造成組織丟失,也容易凍傷手。如果在研缽下墊些紗布或濾紙,雖不易滑動,但由于緩沖作用,研磨時不受力,不足取。后來我們作了如下改進:一是做個木支架,即選一塊厚約兩寸的木板,在上面挖個半球形圓洞(大小根據研缽大小而定),木板兩端留一定長度以備手握之用,使用時將研缽卡在半球形洞中,既穩當又不會凍傷手;二是備一條干凈的毛巾或紗布(干的),折成長條形,將研缽包圍起來,兩端合并后用手抓住,這個方法簡單實用,但要特別小心,以免凍傷。液氮罐

        研磨方法

        空缽先用液氮預冷,再將研棒的上端用紗布包裹(用力時手不會痛),組織**切成薄片,研磨時不易濺出,也更容易磨碎,研棒**頂著手心,這樣便于用力。研磨過程中要避免液氮干涸,研磨至細粉即可。待液氮剛蒸發完時,用一個小藥勺取出所需用量進行下一步實驗,或者將組織粉末裝人容器內,保存于一70℃的溫度下,以備下一步實驗用。使用得當的液氮研磨組織法,將為下一步實驗成功奠定了基礎。值得一提的是,操作中所有接觸的器皿及耗材須清洗干凈并消毒。如果研磨組織用于提取RNA時,使用的器皿及耗材必須采用焦碳酸二乙醋(DEPC)滅活RNase并進行高壓消毒處理。
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